請問乳癌患者癌細胞之HER-2表面抗原作FISH與作IHC HER-2+有何相關性？

台北榮民總醫院 腫瘤科 王緯書醫師

答：目前用來治療乳癌的單株抗體Herceptin理論上只對細胞膜上有過多HER2蛋白質表現的細胞才有作用，所以Herceptin治療需篩選HER2陽性的病患才會成功，因此用可靠的方法來檢測腫瘤的HER2狀態十分重要。目前在實驗室檢測HER2基因放大(amplification)或HER蛋白質過度表現的方法有許多種，包括南方點墨法(Southern blot) 、西方點墨法(Western blot)、北方點墨法(Northern blot)、免疫化學染色法(immunohistochemistry)、與螢光原位雜交法(fluorescence in situ hybridization; FISH)。目前只有免疫化學染色法中的DAKO Hercep test 以及兩種螢光原位雜交法(Vysis PathVysion HER-2 DNA Probe Kit及Oncor INFORM HER-2/neu)已通過美國食品藥物管理局的驗證，似乎是比較可靠的方法。

　　 免疫化學染色法與FISH均可使用福馬林固定後的組織蠟塊來作，與一般病理標本之處理相同，以前的組織蠟塊也可以做，因此實驗室目前一般均以這兩種方法來檢測HER2。若拿Hercep test 與 FISH來作比較，Hercep test 的操作時間比較短，約4-6小時即可完成，而FISH必須隔夜。在設備上FISH需使用螢光顯微鏡，而Hercep test只需一般光學顯微鏡即可。在分子生物學上，FISH測的是腫瘤細胞的DNA，而Hercep test(免疫化學染色法)測的是細胞膜表面的蛋白質。事實上真正執行基因功能的物質是蛋白質而不是DNA，我們要看HER2基因是否過度表現，當然以觀察細胞膜表面是否HER2蛋白質的量有增加最為直接，也最為可信，實在沒有道理去用FISH來檢測DNA的量。因為有時即使DNA有過度表現，其結果未必能在蛋白質層面表現出來。我們要知道，由DNA表現到蛋白質被製造出來，必須經過很多程序，包括DNA→primary transcript(RNA)→剪去不含蛋白質傳遞訊息的intron→mRNA(只有exon)→蛋白質，中間可能出現很多干擾因素，因此有時DNA有表現，蛋白質卻未必有表現，此外，作免疫化學染色法比較便宜，又省時，比較適合優先當作篩選的工具。

　　使用FISH的優點在於，用傳統的分子生物方學法抽取腫瘤組織的DNA或RNA作南方或北方點墨法的時候，很難避免受到鄰近腫瘤組織的間質組織之干擾，會稀釋腫瘤組織所特有的DNA表現，而FISH可以避免這個問題。FISH在螢光顯微鏡下可以確認出腫瘤所在的位置，以PathVysion test來說，它會把HER2基因部位呈現橘色螢光亮點，它也會將第17對染色體的中心粒(centromere)呈現綠色亮點，我們只要比對橘色及綠色亮點的數目，若橘點/綠點大於2，就表示有HER2基因過度表現(因正常細胞之橘點數目比綠點數目比值小於2)。

　　HER-2 +2的意思是其腫瘤組織在免疫化學染色下的呈色為2價，我們一般以3價(HER-2 +3)最具有臨床意義，可以作為使用Herceptin的依據，HER2+2則必須加作FISH來判斷是否真的有HER2過度表現。而HER-2 0或HER-2 +1則表示沒有HER-2過度表現，不必再作FISH，也不適合使用Herceptin來治療。

登錄日期：92年5月2日