目前對局部淋巴結的標準檢查為在淋巴結中心部位作一到兩片切片以H&E染色,以這樣的程序檢查約有1-5%的標本會低估轉移情形。Yu et al.曾發表過常規淋巴結檢查為陰性的黑色瘤病人中有12%的人若以免疫組織染色結果為第三期的黑色瘤。相關研究也有人報告比率高達25%,臨床醫生似乎應該要發展出更敏感的方法,以期能找出高於75%的微小轉移。本論文指出了額外的免疫組織染色檢查的效能與免疫染色結果必須加上H&E細胞學檢查也同為惡性時才能確認有淋巴結轉移,這樣才能與非特異性的良性痣細胞,巨噬細胞與組織細胞的染色分別。然而從原稿上並不清楚額外的免疫組織染色 (HMB-45, MART-1, or NK1C3)是否比只用S-100染色再加以H&E染色確認的方法可以找出更多有轉移的病人。
14年前,Moffitt Cancer Center的研究人員試圖發展出實質腫瘤病人更好的分期方法。選擇以黑色瘤著手,而且專著於淋巴結的分期,因為這是對於復發與存活最好的預測工具。術前淋巴照影(preoperative lymphoscintigraphy)使我們可以找出有轉移可能性的地方;手術時的技術的發展,可以在手術中取到所謂的前哨結。以上所提,讓我們確定每個有可能轉移的地方都有採樣,以及只將最有可能發現轉移的前哨結送去仔細檢查。這項研究首先發展出一套淋巴結組織培養的技術,可以從31%的之前被認為淋巴結沒有轉移的病人的淋巴結培養出黑色瘤細胞,而且這些較為晚期("upstaged")的病人有較高的復發率與較差的存活率。在這項培養技術被批評太過耗時(約需2-4個禮拜)不切實際後,發展了新的分子生物分析方法。雖然所有細胞都有酥胺基酸酉每(tyrosinase)的基因,但是只有在會製造色素的細胞才會表現信使核糖核酸(mRNA),而反轉錄-多重聚合酉每連鎖反應(RT-PCR)便是利用這種特性,當檢查前哨結、周邊血液及骨髓等若發現這些基因產物,就可以證明已經發生轉移。經由反轉錄-多重聚合酉每連鎖反應作出來的結果發現之前被認為淋巴結沒有轉移的病人中41%是已經有轉移的。再者,這項較敏感的試驗與臨床上的相關性也較好,反轉錄-多重聚合酉每連鎖反應結果陽性而組織學檢查陰性的病人明顯比兩項檢查都陰性的病人有較差的預後。這項結果最近被德國的研究再次証實。