以interleukin-2 (IL-2)接受體為目標的重組毒素來消滅活化的捐贈者T細胞，以避免移植體對抗宿主疾病

Prevention of graft-versus-host disease(GVHD) by elimination of recipient-reactive donor T cells with recombinant toxins that target the interleukin 2 (IL-2) receptor

Bone marrow Transpldntation,1999;23(2)：P137-144

Department Microbiology and Immunology, University of Arizona, Tucson, AZ; and Laboratory of Molecular Biology, Division of Basic Sciences, National Cancer Institute, Bethesda, MD, USA

DT Harris, D Sakiestewa, C Lyons, RJ Kreitman and I Pastan

趙偉婷

  1. 背景
  1. 移植體對抗宿主疾病，肇因於移植體中活化T細胞的產生，限制了異體骨髓移植的應用，同時也是造成病人死亡的主要原因之一。
  2. 很多研究為了消除骨髓移植中的T細胞，使用了單株抗體(mAb)或羊的紅血球細胞。但這些方法遭遇了的問題是不能持續有效的消除T細胞，或者是增加了惡性疾病復發的機會及排斥。
  3. 本實驗的目的是在確定是否有可能選擇性的消除出現在骨髓移植中能攻擊接受者的異體活性T細胞，但不影響其他 T細胞族群。如此移植體對抗宿主疾病可被有效地預防而且不會影響和移植體對抗白血病或細胞植入有關的淋巴球。
  1. 方法:
  1. 人類單核細胞的取得：臍帶血是自足月產的生產中取得；周邊血是由健康的自願者取得。
  2. 移植和移植體對抗宿主疾病誘導：骨髓由成鼠C57 BL6(H-2b)取得5×106個細胞，再混以同種鼠之脾臟細胞50-100×106個細胞，注入被輻射線照射之B6D2(H-2b×d)老鼠體內。老鼠被關入microisolator cage觀察GVHD的發生，並以流體細胞計數儀來分析是否有H-2b cell植入
  3. 活化T細胞的去除：以IL2-PE664E(為IL2和mutant Pseudomonas exotoxin結合的重組蛋白，用於老鼠細胞)或anti-Tac(Fr)-PE38KDEL(為anti-IL2 receptor抗體與mutant Pseudomonas exotoxin結合的重組蛋白，用於人類細胞)來去除老鼠或人之mononncllar cell 中之可能的活化T cell。
  4. 以標準方式測定CFU來看先驅細胞的活性。
  5. 以mixed lymphocyte reaction決定活化T cell的cytotoxicity。
  6. 以limited dilution assay來決定proliferative T細胞先驅細胞之數目。
  7. 以流體細胞計數儀依細胞表面抗原作分類。
  1. 結果
  1. 以針對IL-2接受體所作出之重組毒素可有效去除活化T細胞。
  2. 重組毒素加入並不影響骨髓內造血先驅細胞的生長和數目。
  3. 將造血細胞和接受者細胞及重組毒素作共同培養可減低移植體對抗宿主疾病的發生和嚴重度。
  4. 討論
  1. 將與接受者細胞共同培養過，並曾以重組毒素處理過的造血細胞作移植，可幾乎100%避免移植體對抗宿主反應的發生。
  2. 本研究證實以往有關Pseudomonas exotoxin用來去除活化T細胞之效果。
  3. 本研究之結論是，我們可以有效之去除活化T cell，但又不會影響造血母細胞植入，造血功能均恢復，以及病人的存活。