對於正常個體給予G-CSF後,可降低週邊血液的L-selectin+ T細胞對異體抗原刺激的反應,其效果比L-selectin- T細胞更佳

Administration of G-CSF to normal individuals diminishes L-selectin+ T cells in the peripheral blood that respond better to alloantigen stimulation than L-selectin- T cells

Bone Marrow Transplantation,(1999)23,119-124

N Sugimori, S Nakao, A Yachie, T Niki, A Takami, H Yamazaki, Y Miura, M Ueda, S Shiobara and Tamotsu Matsuda

孫嘉宏

前言:

為了決定是否給予G-CSF後，可誘導T細胞在表現型(phenotype)或功能上的改變，我們檢查了週邊血液T細胞在給予G-CSF前後的反應，而這些接受G-CSF的T細胞是來自正常的個體，用以活化抗原(antigen)和黏附分子(adhesion molecule)的表現。異體周邊血液造血母細胞移植(allogeneic PBSC transplantation, allo-PBSCT)已逐漸被用以治療血液的惡性腫瘤。異體周邊血液造血母細胞移植可快速重建造血功能，而且沒有造成急性移植體對抗宿主疾病(acute GVHD)之嚴重度和發生率的增加。有一些機轉可以用以解釋為何allo-PBSC較allo BM有多達10-20倍的T細胞，但其嚴重移植體對抗宿主疾病的發生率卻不高。這些機轉包括注入大量數目的單核球(monocyte)，而這些單核球可抑制異體抗原，以及在給予G-CSF之後T細胞種類的改變。最近的研究顯示，在給予G-CSF後，老鼠的Th2/Th1比例增加，而老鼠和人類的CD4陰性及CD8陰性的細胞增加。然而，並沒有報告指出給予G-CSF後， T 細胞的表現型(phenotype) 有任何的改變。在本研究中，我們將焦點放在經給予G-CSF後的T 細胞，其活化抗原和黏附分子的表現是否改變。我們發現在一系列與T 細胞活化和黏附有關的分子中，只有L-selectin+ T cell的比例在經過給予G-CSF後，有降低的現象。我們也分析了在給予G-CSF前後,，L-selectin+和L-selectin- T 細胞的功能差異。

方法:

我們選擇了14個正常個體，以皮下注入G-CSF(10ug/kg/day)3-5天，並將他們注射G-CSF前及注射後的周邊單核細胞作分離。以連接螢光物質的單株抗體分析下列細胞表面抗原：CD3,CD4,CD8,HLA-DR, CD45RO,CD45RA,CD25,CD122,CD95,CD11a,CD49d,CD44,和CD62L(L-selectin)。我們以流體細胞儀作分析，並以Mixed lymphocyte Reaction測試T細胞對異體B細胞之反應。

結果:

  1. 我們比較注射G-CSF前後所有CD3+的T細胞的表面抗原，只有L-selectin的表現，在比例上有顯著的由注射前的68%下降至注射後的37%。

  2. 不論在注射G-CSF前或注射後，L-selectin- 的T細胞對異體B細胞刺激的反應是一致的低於L-selectin+ 的T細胞。

討論:

L-selectin+ T細胞的比例在注射G-CSF以後降低，未必是由於L-selectin基因表現的抑制。因為這些L-selectin-之細胞在經過10小時的培養，細胞表面上的L-selectin表現回復到一高的水平。L-selectin+ T 細胞的下降，可能是在G-CSF給予後，由於L-selectin的脫落(shedding)的結果。雖然給予G-CSF後，L-selectin由T 細胞脫落還未被證實，但是已有報告指出經G-CSF注射後，L-selectin可由中性球(neutrophil)和單核球上脫落。L-selectin的脫落是發生在T 細胞被活化時，雖然T 細胞沒有G-CSF受體，但是給予G-CSF後，可能刺激單核球製造monokines，而活化了T 細胞。另一個可能性是L-selectin- T 細胞在給予G-CSF後，比L-selectin+ T 細胞更快釋出至周邊血中，所以導致了周邊血液中L-selectin- T cell的增加。而周邊血造血母細胞移植有較低之GVHD之原因，可能是由於L-selectin- T 細胞無法進入接受者之淋巴系統,而不會暴露在異體抗原之刺激,進而防止了GVHD之發生。總而言之，在給予G-CSF後，周邊血液中 L-selectin+ T 細胞的數目相對降低,可能是造成allo-PBSCT低GVHD發生率之重要原因。