一、 研究目的
人類Ras相關家族1A基因(human Ras association domain family 1A gene, RASSF1A)是一個被分離出的新型抑癌基因(tumor suppressor gene)。我們進行本項試驗以分析RASSF1A基因的啟動序列(promoter region)被甲基化的情形。

二、 研究方法
我們使用的標本包括4個肝癌細胞的細胞株(cancer cell lines)：Hep3B、HepG2、SK-HEP-1、Huh-7，43個B型肝炎病毒相關的肝細胞癌的一個世代組織，以及其相對應非癌細胞組織。使用的方法為亞硫酸鹽定序(bisulfite sequencing)與PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)的方式。

三、 研究結果
在4個正常肝臟組織及10個正常周邊血液單核球細胞中，都沒有出現RASSF1A啟動序列的CpG區塊(CpG islands)甲基化情形；而在4個肝癌細胞的細胞生長系列（Hep3B、HepG2、SK-HEP-1、Huh-7）的CpG區塊(CpG islands)則完全地被甲基化，且RASSF1A基因被抑制。若以DNA甲基化抑制子「5-aza-2'-deoxycytidine」混合之，則能在Hep3B、HepG2的細胞系列中重新啟動、活化RASSF1A基因的表現。在43個肝細胞癌標本中，我們發現有41個（95%）的RASSF1A基因啟動序列，其CpG位罝均被強烈地甲基化。雖然在23個非癌細胞組織中，有16個（70%）亦發現有異質性甲基化(heterogeneous methylation)的情形，但其甲基化的程度與癌細胞組織相比，仍是低了許多。

四、 結論
在目前所發表的所有惡性細胞中，RASSF1A基因啟動序列甲基化的情形，以肝細胞癌有最高的發生率。因而我們推論，RASSF1A基因啟動序列的CpG區塊高度甲基化(hypermethylation of the CpG island)，在此種癌細胞的病理學方面，扮演了一個重要的角色。